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行業動態

COVID-19檢測小貼士
為了支持新型冠狀病毒(COVID-19)的檢測及疫苗研發工作,美國疾病預防控制中心(CDC)和中國政府都已完成了新型冠狀病毒基因組的測序并將結果提交至US NCBI GenBank®數據庫 [1]。近日,IDT收到了來自世界各地研究人員關于新型冠狀病毒檢測試劑盒的詢問,以下是部分簡要說明。

美國疾病預防控制中心

美國疾病預防控制中心檢測試劑盒* 靶向COVID-19核衣殼蛋白基因(N-基因)上的不同位點。該試劑盒中的3組引物/探針必須與靶向人RNase P基因的內部對照同時運行。每個患者樣本共需進行4次qPCR檢測。

1.該檢測試劑盒采用一步法qPCR反應(即逆轉錄和后續qPCR反應在同一步驟中完成);

2.所有3次N-基因檢測只有在Cq <35時方可視為陽性結果;

3.RNase P內部對照反應是關鍵。Cq >35表示樣本提取不佳,需要重復實驗;

敬請查閱最新的美國疾病預防控制中心 COVID-19 RT-PCR檢測方法實驗室指南,獲取相關文檔及實驗方案。

與其他檢測試劑盒的比較

世界衛生組織(WHO)

世界衛生組織實驗方案不同于美國疾病預防控制中心實驗方案。世界衛生組織建議需進行3次qPCR反應來確認是否感染COVID-19。盡管這是一套完整的實驗方案,但沒有美國疾病預防控制中心檢測方法來得快,因為它需要連續進行3次檢測,且必須觀察到陽性結果才能進行下一次檢測。該實驗方案按如下順序進行檢測:

1.冠狀病毒E-基因

2.RdRP基因:針對SARS 冠狀病毒和其他蝙蝠相關冠狀病毒

3.RdRP基因:針對COVID-19

中國疾病預防控制中心

中國疾病預防控制中心檢測試劑盒建議采用2組引物/探針。第1組靶向ORF 1ab,第2組用于確認COVID-19的N-基因。

對照組

初步的電子模擬分析表明,搭配使用 IDT N-基因陽性對照組模板**與美國疾病預防控制中心檢測試劑盒,與使用中國疾病預防控制中心、泰國衛生部以及HKU的引物/探針組進行類似實驗獲得的結果相符。當然,這是基于電子模擬研究,建議用戶在自己的實驗室中對所選試劑盒進行驗證。


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